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無血清培養(yǎng)基更換后細胞大量死亡的原因探究
發(fā)布時間： 2022-02-14 點擊次數(shù)： 1523次無血清培養(yǎng)基(SFM)是不需要添加血清就可以維持細胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細胞培養(yǎng)的要求，但對有些實驗卻不適合，如觀察一種生長因子對某種細胞的作用，這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子；又如需要測定某種細胞在培養(yǎng)過程中分泌某種物質(zhì)（抗體、生長因子）的能力；或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細胞，以獲得它們的分泌產(chǎn)物。因此研制出無血清培養(yǎng)基一直是生物科學(xué)工作者努力的目標(biāo)。科研實驗使用轉(zhuǎn)染細胞在轉(zhuǎn)染前要換上無血清培養(yǎng)基。本來條件好好的，轉(zhuǎn)染效率也可以接受。但是過了一段時間就發(fā)生了細胞在有血清的培養(yǎng)基中長的好好的，一換無血清的培養(yǎng)基就死亡的現(xiàn)象。大概4個小時就能看到較多的細胞飄起來。換了不同批次的培養(yǎng)基，但仍不行，這是怎么回事呢？解析：1.兩周后的培養(yǎng)液應(yīng)補加谷氨酰胺，或者重新配液，轉(zhuǎn)染時應(yīng)不含抗生素。2.確認(rèn)操作方法和環(huán)境，建議檢查一下。3.脂質(zhì)體的毒性很大，如果有質(zhì)粒參與對細胞損傷更大，如果在常溫放置過，對細胞更大，假期冰箱是否斷過電。4.培養(yǎng)箱的溫度、CO2濃度，濕度等。
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